चित्रा 1 ठोस चरण पॉलीपेप्टाइड योजनाबद्ध आरेख
1963 में, मेरिफिल्ड ने एक ठोस-चरण पेप्टाइड संश्लेषण विधि प्रस्तावित की, जिसने पेप्टाइड अनुसंधान के लिए एक व्यापक स्थान खोला और आणविक जीव विज्ञान और अन्य क्षेत्रों के विकास को बहुत बढ़ावा दिया। इसी कारण मेरिफिल्ड को 1984 में रसायन विज्ञान में नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया।
1990 के दशक के बाद से, पॉलीपेप्टाइड संश्लेषण प्रौद्योगिकी की क्रमिक परिपक्वता के साथ, अधिक से अधिक सक्रिय पॉलीपेप्टाइड विकसित किए गए हैं और दवा, भोजन, सौंदर्य प्रसाधन, कृषि, पशुपालन, और इसी तरह के क्षेत्रों में व्यापक रूप से लागू किए गए हैं। ठोस-चरण पॉलीपेप्टाइड संश्लेषण विधि का भी व्यापक रूप से उपयोग किया गया है। इस पत्र में, ठोस चरण पेप्टाइड संश्लेषण रिएक्टर के अनुसार ठोस चरण संश्लेषण और पेप्टाइड्स की दरार पेश की जाती है।
चित्रा 2 पूर्ण ठोस चरण पॉलीपेप्टाइड संश्लेषण रिएक्टर का क्षेत्र अनुप्रयोग
Ⅰ। ठोस चरण पेप्टाइड संश्लेषण
मैं। खिलाना
एक ठोस चरण संश्लेषण में राल जोड़ना, सूजन के लिए डीसीएम जोड़ना, निकालना, धोने के लिए डीएमएफ जोड़ना, धोने के बाद, स्टैंडबाय के लिए नाली।
द्वितीय। वाष्पीकरण
DMF की एक निश्चित मात्रा में अमीनो एसिड को भंग करना, सक्रियण के लिए एक संघनक एजेंट जोड़ना, एक ठोस चरण सिंथेसाइज़र में डालना, प्रतिक्रिया एकाग्रता के लिए DMF को पूरक करना और प्रतिक्रिया के लिए सरगर्मी करना।
तृतीय। सुरक्षात्मक समूह को हटाना
कैसर अभिकर्मक के साथ प्रतिक्रिया की डिग्री का पता चला। प्रतिक्रिया पूरी होने के बाद, विलायक को पंप किया गया, इसके बाद DMF की धुलाई की गई। सुरक्षात्मक समूह को हटाने के लिए PIP/DMF समाधान जोड़ा गया था। कैसर अभिकर्मक के साथ प्रतिक्रिया की डिग्री का पता चला। प्रतिक्रिया पूरी होने के बाद, विलायक को पंप किया गया, इसके बाद डीएमएफ धुलाई की गई, जिसमें अगला अमीनो एसिड जोड़ा गया।
iv.संघनन चक्र
राल अनुक्रम के अनुसार अमीनो एसिड को क्रमिक रूप से जोड़ना, "डिप्रोटेक्शन-वाशिंग-एक्टिवेटिंग अमीनो एसिड-फीडिंग कंडेनसेशन-वॉशिंग" के चरणों के अनुसार संघनन चक्र संचालन करना, और अमीनो एसिड अनुक्रम के अनुसार शेष एन अमीनो एसिड के संघनन को पूरा करना .
मैं। निर्वहन
संश्लेषण के बाद, राल को स्टेनलेस स्टील ट्रे में राल संकुचन और निर्वहन को पूरा करने के लिए आईपीए और डीसीएम के साथ क्रॉस-वॉश किया गया था।
द्वितीय। राल सूखना
राल को कमरे के तापमान पर वैक्यूम सुखाने वाले ओवन में सुखाना, सुखाने के बाद तौलना और उपज की गणना करना।
तृतीय। कार्बनिक अपशिष्ट तरल वसूली, केंद्रीकृत उपचार।
iv. क्लियरिंग
ऑपरेटर ऑपरेशन के बाद समय में साइट को साफ करेगा।
Ⅱ। राल क्रैकिंग
मैं। तरल तैयारी
उस लिसिस समाधान को लिसिस समाधान के घटक अनुपात के अनुसार तैयार करें, और लिसिस समाधान को पहले से कोल्ड स्टोरेज के लिए फ्रीजर में रखें।
द्वितीय। खिलाना
एक प्रतिक्रिया केतली में पेप्टाइड राल जोड़ना, पूर्व-ठंडा क्रैकिंग तरल जोड़ना और प्रतिक्रिया के लिए सरगर्मी करना।
तृतीय। निर्वहन
क्रैकिंग के बाद उस रिएक्शन सॉल्यूशन को डिस्चार्ज करना, रेजिन को हटाने के लिए फिल्टर करना और टीएफए से धोना।
iv. एकाग्रता
कमरे के तापमान पर एक छोटी मात्रा में एकाग्रता के लिए तरल को एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता में स्थानांतरित करें।
वी। वर्षा
केंद्रित प्रतिक्रिया समाधान को प्री-कूल्ड मिथाइल टर्ट-ब्यूटाइल ईथर (ईथर के रूप में संक्षिप्त) में डाला जाता है और बड़ी मात्रा में ठोस पदार्थों को अवक्षेपित करने के लिए हिलाया जाता है।
vi. केन्द्रापसारण
गंदले द्रव को सेंट्रीफ्यूग किया जाता है और प्री-कूल्ड ईथर से धोया जाता है।
मैं। क्रूड पेप्टाइड सुखाने
शुद्ध कच्चे पेप्टाइड को कमरे के तापमान पर सुखाने के लिए वैक्यूम सुखाने वाले ओवन में स्थानांतरित किया गया था।
द्वितीय। कार्बनिक अपशिष्ट तरल वसूली, केंद्रीकृत उपचार।
तृतीय। क्लियरिंग
ऑपरेटर ऑपरेशन के बाद समय में साइट को साफ करेगा
चित्र 3 पूर्ण सेट ठोस चरण पॉलीपेप्टाइड दरार केतली
वास्तविक उत्पादन प्रक्रिया में, क्रैक किए गए कच्चे पेप्टाइड को शुद्धिकरण, एकाग्रता, निस्पंदन और फ्रीज-सुखाने जैसी प्रक्रियाओं के अधीन भी होना चाहिए, जिसे इस पेपर में विस्तार से वर्णित नहीं किया जाएगा।
वर्तमान में, छोटी पेप्टाइड श्रृंखलाओं के संश्लेषण की प्रक्रिया अपेक्षाकृत परिपक्व है, जबकि बड़े आणविक द्रव्यमान और लंबी पेप्टाइड श्रृंखलाओं वाले प्रोटीन पदार्थों के लिए, ठोस-चरण संश्लेषण तकनीक की कुछ सीमाएँ हैं, और इस बीच, उच्च लागत और जैसी समस्याएं हैं। पार्श्व प्रतिक्रियाओं के साथ। इसलिए, पेप्टाइड्स के ठोस-चरण संश्लेषण के आधार पर, अभी भी नए तरीके खोजने की जरूरत है।
